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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書

簡要描述:小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書
該細(xì)胞轉(zhuǎn)染了NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,表達(dá)多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白(LDL)證實(shí)了該細(xì)胞株的內(nèi)皮細(xì)胞特性。細(xì)胞因子和脂多糖(LPS)可誘導(dǎo)細(xì)胞分泌MAdCAM-1和E選擇素。TNF-α、IL-1和LPS的誘導(dǎo)是時(shí)間和濃度依賴。早代數(shù)的未刺激細(xì)胞會(huì)分泌MAdCAM-1和VCAM-1,但找過30代不分泌。細(xì)胞會(huì)組成

  • 產(chǎn)  地:上海
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2024-08-25
  • 訪  問  量:1351

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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書

該細(xì)胞轉(zhuǎn)染了NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,表達(dá)多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白(LDL)證實(shí)了該細(xì)胞株的內(nèi)皮細(xì)胞特性。細(xì)胞因子和脂多糖(LPS)可誘導(dǎo)細(xì)胞分泌MAdCAM-1和E選擇素。TNF-α、IL-1和LPS的誘導(dǎo)是時(shí)間和濃度依賴。早代數(shù)的未刺激細(xì)胞會(huì)分泌MAdCAM-1和VCAM-1,但找過30代不分泌。細(xì)胞會(huì)組成型分泌ICAM-1,并且表達(dá)量會(huì)在LPS、IL-1和TNF-α刺激下增多。P選擇素在早代數(shù)和晚代數(shù)細(xì)胞中受TNF-α誘導(dǎo)分泌,但30代后分泌量增加。

 

產(chǎn)品介紹

生長特性 貼壁

形態(tài) 梭形

培養(yǎng)基 90% RPMI-1640+10%FBS

生長條件 95%空氣+5% 二氧化碳   37攝氏度

凍存條件 90%FBS +10%DMSO

污染檢測(cè) 支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)結(jié)果為陰性

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)步驟

收到常溫細(xì)胞后處理方法

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài).

3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,貼壁特性(貼壁/懸浮),細(xì)胞形態(tài),所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基.血清比例,所需細(xì)胞因子,傳代比例,換液頻率等.

4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,記錄細(xì)胞生長狀態(tài).

5. 貼壁細(xì):若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ML左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松.

6. 懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ML無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打.重懸.鏡檢時(shí),基細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作.

方     式: 詳詢經(jīng)理

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書

 內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。

 

 
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
 
 

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